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MALDI蛋白樣品處理試劑盒

產品及特點本產品用于基質輔助激光解吸離子化（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI）分析，所含的基質液是 MALDI 分析的必 不可少的關鍵成分，其主要作用一是起到分子溶劑的作用，使樣品分子分開， 但又不會使蛋白質發生共價修飾；而是能從激光脈沖中吸收能量，使蛋白質 發生瞬間相變，用于質譜分析。本產品的特點是：

1. 即開即用，用戶不需要單獨準備各種成分。

2. 經過優化，可用于各種樣品的 MALDI 分析。

3. 可以選擇 CCA（羥基苯丙烯酸）、DHB（2,5-二羥基苯甲酸）和 SA（芥 子酸）三種不同的基質。CCA 適用于分子量在 5Kd 一下的蛋白質和多 肽分析（肽指紋圖譜）；DHB 適合于一般蛋白質、多肽、低聚糖、脂和 合成多聚物的分析；SA 適合分子量在 3Kd-150Kd 的蛋白質分析。
規格及成分 成份500 次包裝
（CAT#:LM111004-500）
MS 專用溶解液 50 mL
基質液成份一 50 mg（干粉）
基質液成份二 10 mL
使用手冊 1 份

運輸及保存 常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑 MilliQ 水（可選

使用方法

一：樣品準備

1、 將蛋白樣品真空凍干后加入 MS 專用溶解液 100 uL，溶解半小時（期間 可以按下步配制基質液）。蛋白質的終濃度好在 1-10 pmol/uL 之間。 如果是 Reverse-Phase-HPLC 制備的樣品，則可以不加 MS 專用溶解液 而直接使用。注意：一定要在蛋白質樣品真空凍干前將其中的緩沖液、 鹽、去污劑和變性劑等去除，否則它們會嚴重影響蛋白質晶體的形成， 沒有蛋白晶體的形成就不能進行 MALDI 分析。

2、 稱量 1 mg 左右的基質干粉到一干凈的 EP 管中，按每 mg CCA 加 100 uL 基質液成份二的比例加入基質液成份二，混勻后離心。注意：此是用 于結晶用的飽和溶液，可能有沉淀，故需要離心。注意：基質液好新 鮮配制。本試劑盒提供 50mg，足夠配 50 次 200 uL 的基質液。

3、 選用下面兩種上樣法之一上樣。也可以自選其他的上樣方法。

二：Dried-Droplet 法上樣

1、 將 1 uL 蛋白質樣品與 1 uL 新配的飽和基質液混勻。注意：可以多做幾 個不同的蛋白質樣品和基質液的比例，在 1:1-10:1 均可。

2、 用移液器將 1 uL 混合液點到 MS 儀器的樣品靶上，讓液體在室溫下揮發 干凈。注意：不要有氣泡，槍頭也不要觸及靶面，也不能攪動上樣后的 混合液，在未結晶之前不要搖晃。樣品靶必須充分清洗干凈，以免上次 試驗的殘留樣品的干擾。

3、 如果樣品中含有非揮發性雜質，在此步可以用自備的 MilliQ 水洗滌晶體 一次。

4、 將樣品靶插入質譜儀內，后續操作按 MALDI-TOF 儀器使用手冊進行。

5、 同樣方法處理自備對照樣品（一般儀器廠家提供）。

三：Thin-Layer 法上樣

1、 用移液器將 1 uL 基質液點到 MS 儀器的樣品靶上，在基質液揮發前迅速 進入下一步操作。

2、 迅速用移液器將 1 uL 樣品點到 MS 儀器的樣品靶上，讓液體在室溫下揮 發干凈，一般需要 5 分鐘。

3、 將樣品靶插入質譜儀內，后續操作按儀器使用手冊進行。

4、 同樣方法處理自備對照樣品（一般儀器廠家提供）。

5、 同樣方法處理標準品（儀器廠商提供）。