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EB替代染料              D1210

 

描述：EB替代染料是一種可代替溴化乙錠(EB)的核酸染液(20000倍濃縮液)，使用方法與EB完全相同。在紫外燈下雙鏈DNA呈現綠色熒光，而單鏈RNA或DNA呈橙紅色熒光，其靈敏度與EB相當。小鼠皮下注射試驗尚未發現此EB替代染料有致癌作用；而溴化乙錠是一種疑似致癌劑。因此可用EB替代染料代替溴化乙錠進行核酸熒光染色。

 

儲存：4℃避光保存  一年有效

 

使用方法:

1.         每100 ml融化的瓊脂糖膠溶液中，加入2-5μl EB替代染料，輕輕搖勻。

2.         冷卻至60℃左右(不燙手)時倒膠，待瓊脂糖膠完全凝固后上樣電泳。

3.         電泳完畢在紫外燈下觀察。雙鏈DNA呈綠色熒光，單鏈RNA或DNA呈橙紅色熒光。按照與溴化乙錠相同的方法進行熒光照相。

4.         也可直接進行不含染料的瓊脂糖膠電泳，電泳后將凝膠放入加有2-5μl EB替代染料/100ml電泳緩沖液或蒸餾水中染色10分鐘。

 

注意事項:

1.       膠太厚會影響檢測的靈敏度。

2.       EB替代染料可使核酸電泳遷移速率略有加快。

3.       照像記錄時用紅色濾光片效果會更好一些。

4.       雖然尚未發現EB替代染料有致癌作用，但作為有機化學試劑可能有其它未曾檢測到的輕微毒性。操作時仍應戴手套進行防護。

5.       染色過度可用蒸餾水脫色，染色不足可以加入較多的染料。