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描述： 

碘化丙啶 別名:皮薩草, 英文名稱: propidium iodide，CAS號: 25535-16-4, 分子式: C₂₇H₃₄I₂N₄, 分子量: 668.40。 碘化丙啶（PI）是一種溴化乙啶的類似物，可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對中釋放紅色熒光的熒光染料，無堿基特異性。可對DNA染色的細胞核染色試劑。碘化丙啶不能通過活細胞 膜，即正常細胞和凋亡細胞在不固定的情況下對PI拒染；而壞死細胞由于失去膜的完整性，PI能穿過破損的細胞 膜而對核染色，可鑒別死細胞。PI經常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。碘化丙啶與雙鏈DNA結合后產生熒光的強度與雙鏈DNA的含量成正比，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然后根據DNA含量的分布情況，可以進行細胞周期和細胞凋亡的分析。碘化丙啶染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1～2之間。凋亡細胞由于細胞核發生濃縮以及發生DNA片段化，導致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失，因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現明顯的弱染，即熒光強度小于1，在流式檢測的熒光圖上出現所謂的sub-G1峰，即凋亡細胞峰。PI-DNA復合物的激發和發射波長分別為535 nm和615 nm。本產品為PI水溶液，濃度為1mg/ml。使用時根據實驗不同直接將本產品用相應溶液稀釋到工作濃度。

適用范圍： 

本品常用于流式細胞儀分析和顯微鏡觀察，檢測細胞凋亡或細胞壞死，以及細胞周期的分析。

儲存： 

-20℃ 避光保存6個月；4℃保存1個月。

組成：  

碘化丙啶染色液（1mg/ml）   1ml， 5ml   稀釋液                    50ml,

染色步驟：

1. 培養細胞染色

（1）染色前取適量PI水溶液加到稀釋液中，制備成PI工作液（為20～50μg/ml）。

（2）將1/10培養基體積的PI溶液加入到細胞培養基中，37℃培養細胞10-20分鐘。

（3）用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次，熒光顯微鏡觀察。

2. 固定細胞染色

（1） 單層細胞培養標本或懸浮細胞經4℃預冷70％乙醇或4% 多聚甲醛固定1小時。

（2） 用0.01mol的PBS（pH 7.4）沖洗。

（3） 瀝干后加入PI工作液，室溫孵育15分鐘；細胞含量范圍一般為0.1～1×106之間。

（4） 用于流式細胞儀檢測；或沖洗后封片, 熒光顯微鏡下觀察，激發波長為535nm，發射波長為615nm。

染色結果：

熒光顯微鏡觀察，DNA呈紅色熒光.

說明：

1.  熒光染料都存在淬滅的問題，建議工作液用前配制；染色后盡快檢測。為減緩熒光淬

滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

2.  在獲得細胞沉淀的離心過程中，對于特殊細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當提高 

離心力或延長離心時間。

3.  如果檢測組織的細胞周期與細胞凋亡，必須把組織制備成單細胞懸液，才可以進

行檢測。

1.  凋亡細胞的標志之一是DNA可染性降低。而當DNA含量的降低或者DNA與染料結合

能力下降也會導致DNA可染性降低，在分析的時候應特別注意。

2.  PI對人體有一定刺激性，操作時請小心，以避免直接接觸人體或吸入體。

3.  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。