深圳康體生命科技有限公司
主營產(chǎn)品: 試劑
康體生命生物試劑羊駝納米抗體定制抗體篩選KTSM0002
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深圳康體生命科技有限公司:
成立于2016年,是一家SdAb納米抗體研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體化的國家高新技術(shù)公司,實(shí)驗(yàn)室擁有面積2000平米及千萬的儀器設(shè)備。主營業(yè)務(wù):為國內(nèi)外(上市醫(yī)藥企業(yè)) (診斷企業(yè)) (高校科研機(jī)構(gòu))提供抗體藥物CRO業(yè)務(wù)。技術(shù)核心擁有覆蓋鯊魚、駱駝、羊駝等物種的駝?lì)惣{米抗體藥物篩選平臺(tái),提供從抗原、免疫、建庫、篩選、表達(dá)純化、功能驗(yàn)證、發(fā)酵罐生產(chǎn),各階段的納米抗體藥物定制服務(wù)。
納米抗體相對(duì)于傳統(tǒng)抗體有很大的優(yōu)勢(shì):
納米抗體分子量特別小,是傳統(tǒng)抗體的1/10,而且穩(wěn)定性,組織穿透力,和靶點(diǎn)結(jié)合特異性更好更強(qiáng),適合大規(guī)模生產(chǎn),容易體外改造,更宜人源化,親和力好,一般都是nm級(jí)有些可以達(dá)到pm級(jí)。可用于基礎(chǔ)研究、細(xì)胞治療、診斷等方面。
技術(shù)服務(wù)流程:
免疫一只空白適齡羊駝(1-3歲澳洲進(jìn)口),免疫四次,兩周免疫一次,免疫完了抽50ml pbmc外周血,ELisa檢測(cè)血清滴度要大于10^5;然后構(gòu)建噬菌體文庫,建庫的標(biāo)準(zhǔn)是10^8以上;抗體篩選,可以保證提供20條以上不同氨基酸的陽性克隆序列(如下圖)
噬菌體展示技術(shù)是一種由Simth于1985年建立的用于識(shí)別蛋白質(zhì)和它相互作用蛋白的體外篩選技術(shù)。噬菌體展示的具體原理是將外源蛋白質(zhì)的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白的一個(gè)基因上,使外源基因隨著外殼蛋白的表達(dá)而表達(dá),最終蛋白以與外殼蛋白融合的形式展示在噬菌體表面。被展示的蛋白或者多肽可以保持相對(duì)的空間結(jié)構(gòu)和生物活性,因而可以利用靶蛋白對(duì)其進(jìn)行篩選。
構(gòu)建抗體文庫是利用噬菌體展示技術(shù)進(jìn)行高親和力抗體篩選的第一步。通過將抗體基因克隆到相應(yīng)噬菌體載體上可以將外源基因插入噬菌體基因適當(dāng)位置并隨著隨著噬菌體傳代,最終使外源蛋白展現(xiàn)在子代噬菌體的表面。
篩選的方法主要分為固相篩選和液相篩選兩種。通過生物淘洗法、競(jìng)爭(zhēng)法、消減法、選擇性感染篩選、延遲性感染篩選等方法可以對(duì)和靶蛋白強(qiáng)力結(jié)合的基因片段篩選出來。具體地,篩選過程以靶蛋白為固定相,以噬菌體展示文庫為流動(dòng)相,經(jīng)過一段時(shí)間的共同孵育后,洗去未結(jié)合的游離噬菌體,然后以競(jìng)爭(zhēng)受體或酸洗脫下與靶分子結(jié)合吸附的噬菌體,洗脫的噬菌體感染宿主細(xì)胞后經(jīng)繁殖擴(kuò)增,進(jìn)行下一輪洗脫,經(jīng)過3輪~5輪的“吸附-洗脫-擴(kuò)增”后,即可得到與靶蛋白具有高親和性的抗體。經(jīng)過篩選后,對(duì)篩選得到的蛋白進(jìn)一步用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定或免疫印跡法對(duì)其進(jìn)行特異性篩選,獲取目的克隆或鋪盤進(jìn)行單克隆分離繼而進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。