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線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒測(cè)定意義

測(cè)定意義：

線粒體是半自主性細(xì)胞器，不僅是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷（ATP）的主要場(chǎng)所，為細(xì)胞的活動(dòng)提供能量，而且在許多生命活動(dòng)中具有重要調(diào)控作用。因此，準(zhǔn)確和全面分離保持正常活性的線粒體已經(jīng)成為許多研究的前提。

測(cè)定原理：

利用專門試劑溫和勻漿組織和細(xì)胞，再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體；利用專門試劑，配合超聲波破碎線粒體，可以得到保持活性的線粒體酶。

需自備的儀器和用品：

超聲波破碎儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

提取液：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
操作步驟：
一、粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清等液體：直接測(cè)定。
二、測(cè)定操作： 
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412 nm，蒸餾水調(diào)零。 
2.試劑二置于37℃水浴中預(yù)熱30min。 
3.空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL蒸餾水、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，迅速混勻，于412nm處測(cè)定3min內(nèi)吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2。△A空白管=A2－A1 
4.測(cè)定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，，迅速混勻，于412nm處測(cè)定3min內(nèi)吸光值變化，第10s吸光值記為A3，第190s吸光值記為A4。△A測(cè)定管=A4-A3 

線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：雙試劑，96孔板直接操作，快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測(cè)線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。
6、回收試驗(yàn)： X =102.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng)，不受類SOD物質(zhì)的干擾
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒產(chǎn)品售后有保障、品質(zhì)無(wú)憂    高保障    品質(zhì)現(xiàn)貨

1.嚴(yán)格的質(zhì)量控制：嚴(yán)格檢測(cè)每一批產(chǎn)品，確保產(chǎn)品穩(wěn)定性，靈敏度。
2.專業(yè)的產(chǎn)品包裝：適應(yīng)產(chǎn)品特性的包裝，確保運(yùn)輸?shù)陌踩院痛鎯?chǔ)的有效性
3.秉持“客戶購(gòu)買我們的產(chǎn)品就是收獲一份價(jià)值，一份安心的信念，竭誠(chéng)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，售后服務(wù)無(wú)優(yōu)