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主營(yíng)產(chǎn)品: 反應(yīng)釜, 粉碎機(jī), 過(guò)濾機(jī), 三維混合機(jī), 干燥機(jī), 振動(dòng)篩, 儲(chǔ)罐, 冷凝器, 分散機(jī), 壓濾機(jī), 烘箱, 行星攪拌機(jī), 蒸發(fā)器, 閃蒸干燥機(jī), 刮刀離心機(jī), 制冷機(jī), 二維混合機(jī), 疊螺脫水機(jī), 螺旋板換熱器
二手不銹鋼層析大孔樹(shù)脂柱-實(shí)驗(yàn)吸附柱-分離柱-離子交換柱設(shè)備
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層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和
流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。柱層析技術(shù)(chromatography) 又稱柱色譜技術(shù),
主要原理是根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離開(kāi)來(lái)。
柱層析操作時(shí),先在圓柱管中先填充不溶性基質(zhì),形成一個(gè)固定相。將樣品加到柱子上,用特殊溶劑洗脫,溶劑組成流動(dòng)相。在樣品從柱子上洗脫下來(lái)的過(guò)程中,根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。
柱層析的上樣也有干法和濕法之分:干法就是把待分離的樣品用少量溶劑溶解后,在加入少量硅膠,拌勻后再旋去溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層。干法上樣較麻煩,但可以樣品層很平整。濕法上樣就是用少量溶劑(就是展開(kāi)劑,如果展開(kāi)劑的溶解度不好,則可以用一極性較大的溶劑,但必須少量)將樣品溶解后,再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液,沿著層析柱內(nèi)壁均勻加入。然后用少量溶劑洗滌后,再加入。
柱層析法的原理,柱層析法的分離原理是根據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附,極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附。當(dāng)采用溶劑洗脫時(shí),發(fā)生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過(guò)程,吸附力較強(qiáng)的組分,移動(dòng)的距離小,后出柱;吸附力較弱的組分,移動(dòng)的距離大,先出柱。一般都是利用極性相似相容原理,看流動(dòng)相與固定相的極性,大部分是固定相的極性小于流動(dòng)相,然后流動(dòng)相的極性與所要洗脫的物質(zhì)極性比較接近,從而將物質(zhì)洗脫下來(lái)。
柱層析硅膠的一般使用方法
3.1. 稱重。 對(duì)于200-300目硅膠,稱取樣品量的30-70倍; 如果極難區(qū)分,也可以使用100倍量的硅膠H。 干硅膠的表觀密度約為0.4,所以需要稱取40g硅膠,或用燒杯量取100ml。
3.2. 攪拌成勻漿。 加入兩倍于干燥硅膠體積的溶劑,并用玻璃棒攪拌。 如果洗脫液是石油醚/乙酸乙酯體系,則與石油醚混合。 如果不能攪拌成勻漿,則說(shuō)明溶劑中的水分含量過(guò)高,尤其是乙酸乙酯。 如果分配色譜與水不相容,需要提前用無(wú)水硫酸鈉長(zhǎng)時(shí)間干燥。無(wú)水氯化鈣干燥以除去1%的醇。 如果樣品對(duì)酸敏感,請(qǐng)勿使用系統(tǒng)通過(guò)色譜柱。
3.3. 裝柱。 用棉花代替海砂將柱底擰緊,加入約1/3體積的石油醚,安裝儲(chǔ)液球,打開(kāi)柱下活塞,將勻漿一次倒入儲(chǔ)液球中。 當(dāng)它沉降時(shí),會(huì)有一些硅膠粘在儲(chǔ)液球中,用石油醚將其沖入色譜柱。
3.4. 壓實(shí)。 沉降完成后,再加入石油醚,用雙球或氣泵加壓至流量恒定。 柱床被壓縮到大約 9/10 的體積。 無(wú)論是常壓柱還是加壓柱都應(yīng)進(jìn)行此步驟,這樣可以大大提高分離度,并避免在通過(guò)柱時(shí)因柱床收縮而開(kāi)裂。
3.5. 加載樣本。 干法和濕法都可以使用。 海沙不是一定的。 上樣后,加入一些淋洗液,然后在靠近硅膠表面的地方塞上一大塊脫脂棉。 然后就可以放心的加入大量的淋洗液,而不會(huì)損壞硅膠的表面。
3.6. 通過(guò)和收集。 柱層析實(shí)際上是擴(kuò)散和分離之間的權(quán)衡。 洗脫強(qiáng)度太低不好,推薦梯度洗脫。 收集例:10mg上樣量,1g硅膠H,0.5ml收集1個(gè)餾分; 1-2g上樣量,50g硅膠(200-300目),20-50ml收集1個(gè)餾分。
3.7. 檢測(cè)。 需要使用更特殊的噴涂劑。 如果只使用紫外線燈,會(huì)損失更多的產(chǎn)品。 紫外線的靈敏度一般比噴劑低1-2個(gè)數(shù)量級(jí)。
3.8. 發(fā)送分?jǐn)?shù)。 收集的產(chǎn)品經(jīng)過(guò)旋轉(zhuǎn)干燥,通常需要在發(fā)送光譜之前進(jìn)行重結(jié)晶。 如果樣品太小或呈液態(tài),可以通過(guò)小凝膠柱作為純化方法,然后再發(fā)送光譜。 可以去除氫譜中約1.5 ppm的所謂“硅膠”峰。