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生物指示劑分類：

1.根據結構，可分為片狀生物指標和獨立生物指標；薄片狀生物指標需要使用陽性和陰性對照，而獨立的生物指標只需是陽性即可。

2.根據ISO11138-1（2006）的分類，當前的生物指標包括環氧乙烷滅菌的生物指標，濕熱滅菌的生物指標，干熱滅菌的生物指標以及過氧化氫低溫等離子體滅菌的生物指標和甲醛殺菌的生物指示劑。

3.根據栽培時間可分為一般生物指標和快速生物指標。通用的生物指示劑是基于在孢子復蘇后由指示劑種類的代謝引起的培養液的pH值變化，并且酸堿指示劑改變顏色以進行解釋。時間通常超過24或48小時；而快速的生物指示劑是基于孢子復蘇。酶促反應通過熒光來解釋，時間通常為3-4小時。同時，國外正在開發更快速的生物指示劑，預期結果將在一小時內獲得。

生物指示劑的基本信息

1.生物指示劑是一種特殊的活微生物產品，可用于確認滅菌設備的性能，驗證滅菌程序并監控生產過程中的滅菌效果。

2.生物指示劑的定義：它對特定的滅菌處理具有一定的抵抗力，并裝在用作細菌載體的內包裝中。用于確認滅菌設備的性能，驗證滅菌程序以及監視生產過程的滅菌效果。

3.生物指示劑的分類：1）根據結構，可分為片狀生物指示劑 和自足生物指示劑（self-）；薄片狀生物指標需要使用陽性和陰性對照，而包含生物指標的只需使用陽性對照。

滅菌生物指示劑原理

1.濕熱滅菌：濕熱滅菌最常用的生物指示劑是嗜熱脂肪芽孢桿菌的孢子，例如NCTC10007，NCIMB8157，ATCC7953。D值為1.5-3.0min，每片（或每瓶）的活孢子數為5 * 10（5）-5 * 10（6），應在121℃下完全殺死19min。另外，也可以使用梭狀芽孢桿菌的孢子，例如NCTC8594，NCIMB8053，ATCC7955，其D值為0.4-0.8分鐘。

2.干熱滅菌：干熱滅菌最常用的生物指示劑是枯草芽孢桿菌孢子，例如NCIMB8058和ATCC9372。D值大于1.5分鐘，每塊活孢子數為5 * 10（5）-5 * 10（6）。大腸桿菌內毒素用于驗證去熱原，其添加量不少于1000個細菌內毒素單位。

3.輻射滅菌：輻射滅菌中最常用的生物指示劑是短小芽孢桿菌的孢子，例如NCTC10327，NCIM10692，ATCC27142。每塊活孢子的數量為10（5）-* 10（6），當輻射劑量為25kGy時，D值約為3 kGy。但是，應該指出的是，滅菌產品中所含的微生物可能比短小芽孢桿菌孢子具有更強的輻射抗性。因此，短小芽孢桿菌孢子可用于監測滅菌過程，但不能用于確定滅菌輻射劑量。

4.氣體消毒；環氧乙烷滅菌最常用的生物指示劑是枯草芽孢桿菌孢子，例如NCTC10073，ATCC9372。氣態過氧化氫滅菌最常用的生物指示劑是嗜熱脂肪芽孢桿菌的孢子，例如NCTC10007，NCIM8157，ATCC7953。每塊活孢子的數量為1 * 10（5）-5 * 10（6）。在環氧乙烷滅菌中，枯草芽孢桿菌孢子的D值大于2.5分鐘，環氧乙烷濃度為600 mg / l，相對濕度為60％，溫度為54℃消毒。

生物指示劑的基礎知識

1.生物指示劑的概念：根據ISO11138：

2.生物指示劑：一種含有活微生物并對特定滅菌處理具有一定抵抗力的測試系統；

3. DValueD值：在設定條件下滅活90％的測試細菌所需的時間；

4.過程驗證裝置：具有預定的對滅菌過程的抵抗力的模擬裝置，用于評估滅菌過程的有效性；

5.孢子總數：生產者校準的微生物數量；

6.電阻計：一種特殊的設備，可以在有限條件下的滅菌過程中產生物理/化學變化的組合，以測量生物指標的電阻；

7. ZValueZ值：導致D值減少或增加10倍的溫度變化值；

8.（SAL）無菌保護等級：對滅菌物品

菌株選擇和培養條件

1.壓力蒸汽滅菌生物指示劑：指示菌通常為嗜熱脂肪芽孢桿菌（ATCC7953），培養溫度為56℃；

2.環氧乙烷滅菌的生物指示劑：指示菌通常為枯草芽孢桿菌黑色變體孢子（ATCC9372），培養溫度為37℃；

3.干熱滅菌生物指示劑：指示菌通常是枯草芽孢桿菌黑變種。孢子（ATCC9372），培養溫度為37℃；

4.過氧化氫血漿滅菌的生物指示劑：指示菌通常為嗜熱鏈球菌的孢子（ATCC7953），培養溫度為56℃；